很多超净工作台的用户经常都会提到的一个问题是为什么我们在做抑菌实验中会出现超净工作台被污染,我们要如何防止这类污染呢?以下是我们客户超净工作台使用过程中提出的问题进行解答。
很多用户提出的问题如下:
1、我觉得我已经特别注意灭菌了,可在超净工作台做抑菌实验总污染时还是每次都污染。
2、我用PDA培养基做抑制真菌的实验,每次都有细菌长出来?是不是在超净工作台做抑菌实验总污染情况。
3、现在做一次需要的时间精力可多了,还每次都失败,我都快崩溃了,哪位高人给指点一下关于在超净工作台做抑菌实验总污染怎么办?
4、那个超净台有很多人用过,基本每个人一开始都会污染,但是做几次之后总有一次不污染的。可是我都做了N次了还是污染。
5、我很注意无菌操作的,要不然各位能不能列一下无菌操作的要点?
关于以上超净工作台如何防止污染问题解答如下:
1、所有操作必须在酒精灯火焰周围5厘米内完成(一开始我被烫伤无数次)
2、所有器皿的开口同样不得离开酒精灯火焰5厘米,开口要尽量的小,但接种环不得碰到容器外壁.如果是用接种环做实验,那么最好先找点酒精,进行每步操作之前都把接种环蘸点酒精然后在火上烧
3、另外接种环铁丝和主体连接的那个地方一定要烧干净,那里是最容易染菌的地方,用完的酒精可以倒到酒精灯里做燃料,这样就不怕浪费了(如果你做的是病原菌就免了,小命要紧)
4、平板倒好以后不要拿下盖子,直接摞成一叠让它凝固,这样中间的平板没有水汽(可见我们实验室的超净台污染到了什么地步)
5、超净工作台用之前开紫外消毒半小时,这招对真菌效果不大,但对细菌还是蛮有用的
6、不知道你的污染菌落是细菌还是酵母,但如果是细菌的话,可以看看能不能往培养基里放抗生素。
7、当初我是一周以后才不污染的,是你一个人的问题还是别人也有污染?如果是你一个人的问题,那就是无菌操作的技术不过关;如果是大家都有这个问题,那就是超净工作台的问题。你说的大部分注意要点我基本都已经做到了,就差往培养基里加抗生素了。
从网上也摘录了部分回答:
可不可以麻烦你把这个问题说得更细致一点?
比如什么时候加抗生素,加多少,加哪一种?我要培养的是灰霉菌,我感觉长出的应该是细菌。另外,用PDA培养基培养灰霉菌,ph值有什么要求?
是在培养基灭菌后再加抗生素吗?
还是连抗生素一起进灭菌锅要看你长出来的是什么细菌。。。
我用的最多的抗生素是氨苄,100毫升加36微升……建议你把氨苄和链霉素混加,应该能抑制大部分细菌……PDA培养灰霉应该没太多PH要求吧,实在需要的话把PH调到5……将移液枪的枪头装一盒去灭菌,然后把移液枪,枪头放到超净工作台里,紫外消毒半小时。将培养基加热溶化,放在超净里冷却到约45度,放入抗生素,摇匀,然后倒平板。
其实不同行业所使用的超净工作台种类都是有很大区别,如何做到防止污染的方法显然不止一种,主要还需要用户都去观察了解。